Plymouth Colony var ett affärsföretag mellan en grupp engelska familjer och köpmän från 1620 till 1691. Denna koloni var baserad i den då outforskade Cape Cod-regionen i det som nu är Massachusetts. Trots kolonins relativt korta livslängd och dess tidiga finansiella misslyckanden, anses Plymouth-kolonin vara en av de viktiga grundläggande landmärkena i USA:s historia. 1691 upplöstes kolonin, när den införlivades med den större Massachusetts Bay Colony.
Till skillnad från andra engelska och franska kolonier som sakta dyker upp i den nya världen, började groningen för Plymouth-kolonin med religionsfrihet och inte ekonomisk vinning. En grupp tillbedjare, som fann att deras bibliska religionsmetoder var nedsmutsade av den etablerade kyrkan i England, skilde sig från den anglikanska kyrkan och träffades privat. Dessa människor, som är kända som separatister, förföljdes för sin tro och fängslades samt fick sina hem plundrade. Gruppen flydde till Holland under en period innan de fick tillstånd att bosätta sig på den amerikanska kontinenten.
För att finansiera sin expedition ingick separatisterna avtal med en grupp engelska köpmän, Merchant Adventurers. De försåg separatisterna med medel för sjöresor och förnödenheter i utbyte mot råvaror och varor som skördats från den amerikanska kontinenten. Efter en rad förseningar seglade gruppen på de berömda skeppen Mayflower och Speedwell i september 1620.
Kolonins start i den nya världen var skakig från början. Det turbulenta vädret kastade fartygen ur kurs, och gruppen landade norr om sin förväntade destination, som hade beviljats dem lagligt. Gruppen anlände i början av vintern, oförberedd på de svåra förhållandena på den norra delen av kontinenten. Den första vintern omkom hälften av kolonisterna. Hjälp från de lokala infödingarna räddade nykomlingarna från total katastrof, och en tacksägelsefest hölls året därpå.
Kolonisterna döpte sin anläggning till Plimouth Plantation, och trots deras svårigheter växte kolonin långsamt. De upplevde flera motgångar, såsom nyanlända av religiösa puritanska nybyggare men få medföljande förnödenheter, och det ökande underskottet till Merchant Adventurers för långsamma eller saknade inkomstsändningar. Efter en politisk revolution i England förnyades inte Plymouth Colonys stadga utan absorberades i en större kunglig koloni.
Trots de ekonomiska misslyckandena och tidiga upplösningen av kolonin, lyser Plymouth Colony som ett exempel på självförsörjande regering och religionsfrihet som senare definierade det oberoende USA. När gruppens skepp vandrade ur kurs 1620 skapade separatisterna sitt eget förbund, Mayflower Compact. Detta förbund etablerade den första skriftliga uppteckningen i modern tid av regering med samtycke från folket. Grundat på religionsfrihet banade Plymouth-kolonin vägen för andra religiösa grupper som sökte skydd i den nya världen. Turister kan besöka den ursprungliga platsen för kolonin i Massachusetts och se stenen, Plymouth Rock, på vilken separatisterna påstås ha stigit från Mayflower.