Mikroskop medan gelap adalah mikroskop di mana spesimen tampak terang dengan latar belakang gelap. Mikroskop medan gelap dapat digunakan untuk tujuan pemeriksaan berbagai spesimen, dari sel darah segar hingga serangga hidup. Beberapa mikroskop dilengkapi untuk keperluan mikroskop medan gelap, sementara yang lain dapat dengan mudah dilengkapi dengan perlengkapan yang diperlukan.
Ketika seseorang menggunakan mikroskop medan gelap, sebuah stop diletakkan di antara sumber cahaya dan lensa kondensasi di bawah panggung mikroskop, tempat spesimen berada. Pemberhentian menghalangi bagian tengah berkas cahaya, memungkinkan cahaya masuk di sepanjang sisi panggung saja. Cahaya ini mengenai spesimen dan menyebar, melewati lensa optik dan memenuhi mata orang yang menggunakan mikroskop. Perhentian lain antara panggung dan lensa optik mencegah cahaya langsung mencapai mata, menyebabkan latar belakang tampak gelap karena pengguna hanya dapat melihat cahaya yang tersebar dari spesimen.
Salah satu kelemahan utama menggunakan mikroskop medan gelap adalah memerlukan cahaya intensitas tinggi, karena tingkat cahaya cenderung rendah. Cahaya yang sangat terang dapat merusak beberapa spesimen, yang menjadi perhatian jika spesimen tidak dapat dengan mudah diganti. Aspek-aspek tertentu dari spesimen juga dapat dikaburkan dalam jenis mikroskop ini, seperti ciri-ciri gelap alami seperti pembuluh darah pada serangga, dan ini berarti bahwa pengguna dapat melewatkan beberapa detail penting atau menarik.
Keuntungan utama teknik ini adalah memberikan gambar kontras tinggi. Untuk orang-orang yang memiliki akses terbatas ke peralatan mikroskop yang mahal, menggunakan mikroskop lapangan gelap dapat menjadi alternatif biaya rendah yang menghasilkan data yang berguna untuk sebagian kecil dari biaya. Di laboratorium sains sekolah menengah, misalnya, siswa dapat bekerja dengan mikroskop medan gelap karena sekolah tidak mampu membeli mikroskop kontras tinggi yang mahal. Kadang-kadang juga mungkin untuk melihat partikel yang sangat kecil yang tidak muncul di beberapa jenis mikroskop lainnya.
Toko sains terkadang menjual perangkat mikroskop medan gelap, yang memungkinkan orang mengubah mikroskop konvensional menjadi mikroskop medan gelap. Kit ini dirancang untuk digunakan dengan mikroskop yang memiliki slot untuk filter dan lampiran. Untuk mikroskop yang tidak memiliki fitur ini, efek medan gelap masih dapat dicapai dengan menempelkan cakram bundar seperti potongan koin atau karton ke bagian bawah lensa kondensasi.