Tes antibiogram dapat digunakan untuk dua tujuan yang berbeda. Metode Kirby-Bauer digunakan untuk menguji kerentanan suatu strain bakteri terhadap berbagai antibiotik. Antibiogram juga dapat menentukan konsentrasi hambat minimal (KHM), atau konsentrasi terkecil suatu antibiotik yang akan menghambat pertumbuhan strain bakteri, dengan menggunakan metode pengenceran.
Metode Kirby-Bauer adalah antibiogram yang digunakan untuk menentukan antibiotik terbaik untuk digunakan melawan strain bakteri tertentu. Pengujian dilakukan di cawan petri, yang dangkal, bulat, cawan tertutup yang diisi dengan media agar atau zat seperti gel yang diresapi dengan nutrisi untuk mendorong pertumbuhan bakteri. Strain bakteri yang akan diuji tersebar merata di seluruh permukaan piring. Beberapa cakram kertas bundar, masing-masing diresapi dengan antibiotik yang berbeda, ditempatkan secara merata di atas permukaan piring dan didorong dengan lembut ke dalam agar-agar untuk membuat kontak dengan bakteri. Pelat kemudian dibiarkan tumbuh semalaman di inkubator.
Setelah inkubasi semalam, area melingkar tanpa pertumbuhan bakteri akan mengelilingi setiap cakram kertas. Daerah ini disebut zona hambat. Diameter zona hambat untuk setiap disk diukur dan dibandingkan dengan peta kendali untuk menentukan apakah strain bakteri yang diuji resisten, intermediet, atau rentan terhadap masing-masing antibiotik yang berbeda. Zona hambat yang besar berarti strain bakteri tersebut rentan terhadap antibiotik pada cakram uji.
Metode pengenceran adalah antibiogram yang digunakan untuk menentukan konsentrasi antibiotik yang paling efektif untuk digunakan melawan strain bakteri. Ini dimulai dengan mengkultur atau menumbuhkan bakteri uji dalam semalam dan kemudian memeriksa kultur baru untuk kemurnian atau pemurnian kultur. Dua bakteri kontrol atau pembanding disiapkan juga. Konsentrasi strain bakteri ditentukan dengan menggunakan spektrofotometer, dan konsentrasi diatur ke dalam kisaran yang sesuai untuk metode pengenceran.
Pengenceran serial antibiotik yang akan diuji disiapkan dengan membuat perubahan konsentrasi yang meningkat dan bertahap dalam botol yang berbeda. Satu seri dari berbagai konsentrasi antibiotik diinokulasi dengan jumlah yang sama dengan strain bakteri uji, dan seri lainnya diinokulasi dengan strain bakteri kontrol. Semua konsentrasi antibiotik yang diinokulasi dibiarkan tumbuh semalaman dalam inkubator atau sampai pertumbuhan bakteri yang terlihat diamati di beberapa botol. MIC adalah konsentrasi antibiotik di mana tidak ada pertumbuhan bakteri yang terlihat. Nilai MIC adalah cara terkontrol untuk menilai perubahan resistensi strain bakteri dan menetapkan batasan terapi antibiotik untuk infeksi.