Ett genbibliotek är termen för samlingar av deoxiribonukleinsyra (DNA)-fragment som har klonats slumpmässigt från organismers genom. De klonas som plasmider som kan replikera separat från sina kromosomer och fager, som är ett parasitvirus som livnär sig på bakterier. När de klonas som plasmider består samlingen av värdceller och var och en av cellerna innehåller ett DNA-fragment. Faggenbibliotek är uppbyggda av vad som kallas faglysat, som är rester av förstörda celler med ett DNA-fragment insatt. När genbibliotek innehåller en samling av all genetisk information om en organism, anses de vara ett representativt genbibliotek.
Dessutom kan bibliotek använda cellulär rekombinant nukleinsyra (RNA) för förläggningsmaterial, och denna samling av värdceller med de rekombinanta vektorerna är känd som ett cRNA-genbibliotek. Genbiblioteksscreening hittar särskilda celler som innehåller kloningsvektorer med en speciell gen som söks i ett genbibliotek och använder sedan en av många tekniker för att isolera och skörda dem. När de väl skördats anses cellerna vara klonade. För att ha en rimlig chans att isolera och klona en viss gen, används vanligtvis endast representativa genbibliotek då varje gen och varje original DNA-fragment av ett visst genom samlas in däri. För att nå en 99% chans att lokalisera en viss mänsklig gen för kloning, skulle mer än 600,000 XNUMX klonade celler behöva screenas för att hitta den önskade genen från ett representativt genbibliotek.
DNA extraheras från en organism för att starta ett genbibliotek. Biblioteket är strukturerat för att organisera DNA:t och dess tusentals olika gener. Biblioteket blir en samling av tiotusentals bakteriekolonier, var och en modulerad med ett fragment av DNA från organismen som innehåller en gen av speciellt intresse. Bibliotek innehåller också restriktionsenzymer och en plasmid. Restriktionsenzymerna används för att läsa av DNA:ts nukleotidinformation och används för att skära DNA:t i fragment genom att separera nukleotiderna från varandra.
Samma restriktionsenzymer skär de bakteriella plasmiderna och fragmenten och plasmiderna kombineras i ett provrör för att kombineras, vilket skapar en ny kombination. Dessa rekombinanta plasmider återförs sedan tillbaka till bakteriekultur med användning av antingen värmechock eller elektroporering. Dessa steg utförs om och om igen tills ett helt genbibliotek har bildats för en speciell genomorganism från alla fragmenten av den ursprungliga DNA-extraktionen.