Ansökningar om liv- eller sjukförsäkring kommer ofta att innehålla ett nikotindetektionstest. Gasvätskekromatografi kan detektera nikotin – eller dess primära metabolit, kotinin – i urin-, blod-, saliv- och hårprover. Mätning av kotinin i urin anses vara den mest känsliga tekniken för detektering av nikotin. Inget av dessa test kommer att skilja perfekt mellan aktiva rökare, passiva eller passiva rökare och icke-rökare, eftersom individuella skillnader i nikotinmetabolism varierar kraftigt. Nikotindetektionstester kommer dock att ge en bra uppskattning av den totala nikotinexponeringen.
Nikotin är den beroendeframkallande kemikalien som finns i cigaretter och tuggtobak. Tuggning eller inandning av tobak introducerar nikotin i kroppen, där det metaboliseras av levern och utsöndras i urinen. Den primära metaboliten av nikotin är kotinin, och kotinin är den primära metoden för nikotindetektion, eftersom den har en halveringstid upp till 10 gånger så lång som nikotin. Det är med andra ord stabilt i kroppen mycket längre. I fall av misstänkt nikotinöverdos, som när ett barn äter nikotintuggummi, mäts nikotin istället för kotinin.
Nikotindetektering med hjälp av hårprover är sällsynt utanför experimentella tester, eftersom det är dyrt. Hårtestning kan dock utvärdera långvarig tobaksanvändning, eftersom den kan upptäcka nikotinexponering upp till 10 dagar innan provet tas. Salivnikotintest är enkla och icke-invasiva; saliv absorberas från munnen med hjälp av en provtrasa eller pinne, men det kan vara svårt att få ett tillräckligt stort prov. Barn eller vuxna med torr mun kanske inte producerar tillräckligt med saliv för ett testprov. Salivtester förlitar sig också på mycket nyligen exponering för nikotin och kan misslyckas med att skilja lätta aktiva rökare från passiva rökare.
Blodprover möjliggör detektering av kotinin i blodplasma, även om ett blodprov kräver mycket mer bearbetning än urin- eller salivprover. Blodprovet centrifugeras först för att separera blodkropparna från plasman och tunga proteiner fälls sedan ut. Provröret centrifugeras en andra gång och placeras sedan i en förångare för att avlägsna eventuell kvarvarande vätska; de torra proteinerna, inklusive kotinin, löses upp med metylalkohol. Återigen centrifugeras provröret för att separera eventuella kvarvarande tunga proteiner, och vätskan hälls av och används för analys. Denna process är mer tidskrävande och dyrare än urin- eller salivtester.
Nikotindetektion med urin är mycket känslig och kommer att upptäcka även små nivåer av passiv rökning. Det är den vanligaste metoden som används av försäkringsbolag för att skilja aktiva rökare från passiva rökare. Oavsett om nikotin detekteras genom urin, saliv eller blodserum, kan skillnaden ses mellan personer som aktivt röker tre eller fler cigaretter om dagen och de med höga nivåer av passiv rökning. Storrökare kan också skiljas från lättrökare genom mängden kotinin i provet.