Proteinfosforylering är tillägget av en fosfatgrupp (PO4) till ett specifikt protein, vanligtvis på en serin-, treonin- eller tyrosinrest. I allmänhet är proteinfosforylering ett av de huvudsakliga sätten genom vilka signaltransduktion och enzymatiska aktiviteter regleras i celler. Antikroppar som upptäcker dessa fosforylerade proteinställen kallas fosfoantikroppar. Förmågan att detektera den fosforylerade resten av ett protein på ett specifikt ställe är ett värdefullt verktyg för att detektera aktiviteten hos cellsignaleringsvägar och är en nyckel för att förstå många cellulära signaleringsprocesser.
Tillägget av fosfatgruppen till en serin-, treonin- eller tyrosinrest kan resultera i proteinaktivering eller inaktivering genom att antingen inducera en konformationsförändring i proteinet eller genom att påverka proteinets interaktioner med andra proteiner eller molekyler. Fosforylering spelar en betydande roll i många viktiga cellulära signaleringsprocesser, inklusive celltillväxt och död, vägar som inducerar eller hämmar tumörbildning, hormonella signaleringsprocesser och energiproduktion. Proteiner fosforyleras av enzymer som kallas kinaser och defosforyleras av enzymer som kallas fosfataser. Processen med reversibel fosforylering tillåter därför en cell att utöva strikt kontroll över dessa viktiga signalvägar.
Antikroppar är Y-formade molekyler som innehåller antigenbindande ställen i slutet av varje Y-arm. I allmänhet känner antikroppar igen unika sekvenser i sina motsvarande antigener, som kallas epitoper. Antikroppsproduktion sker naturligt som en del av immunsvaret när en värd exponeras för en främmande kropp, vilket tillåter antikroppen att specifikt känna igen och neutralisera dessa främmande antigener. Denna naturliga process kan användas för forskningsändamål genom att generera antikroppar som specifikt kommer att detektera ett antigen eller protein av intresse. Vid generering av forskningsantikroppar är värdarterna ofta kaniner, möss, får eller getter, men forskare kan också använda immunceller i kultur för att generera antikroppar mot antigenet av intresse.
Fosfoantikroppar kan användas i antingen forskning eller kliniska tillämpningar. I kliniska sammanhang kan detektionen av ett visst fosforylerat protein av en fosfoantikropp i ett tumörprov hjälpa till att bedöma tumörgraden, eller till och med hjälpa till att förutsäga sjukdomsutfall. I forskningsmiljöer används fosfoantikroppar ofta för att studera aktiveringen av cellsignaleringsvägar som svar på en specifik stimulans.
Många antikroppsproduktionsföretag är tillgängliga för att leverera fosfoantikroppar till forskare och kliniker. Forskare kan välja dessa antikroppar från en antikroppskatalog, som ofta innehåller reagenser för hundratals olika fosforylerade proteiner. Dessutom erbjuder flera antikroppsleverantörer produktion av specialanpassade antikroppar för sällan studerade fosforylerade proteiner för vilka en kommersiell fosforantikropp inte finns tillgänglig.