Apa yang Terlibat dalam Mengukur Tingkat Enzim?

Tes laboratorium yang mengukur kadar enzim dan aktivitas enzim dikenal sebagai uji enzim. Ada banyak jenis metode pengukuran yang mengukur laju aktivitas enzim dan penghambatan enzim. Enzim adalah molekul yang memanipulasi molekul lain, yang dikenal sebagai substrat, dengan mengikatnya dan bereaksi secara kimia dengannya untuk menghasilkan banyak produk sampingan. Tes yang mengukur aktivitas ini adalah untuk tujuan yang berbeda, sesuai dengan gejala penyakit tertentu, dan mempertimbangkan langkah-langkah yang berbeda dalam proses enzimatik.

Tes yang memeriksa kinetika enzim menunjukkan seberapa jauh lebih atau kurang dari norma perilaku enzim sebenarnya. Ada faktor-faktor yang harus dikontrol saat mengambil tes enzim, seperti, enzim bekerja dengan cara tertentu sesuai dengan suhu dalam suatu organisme, dan enzim tidak dapat mentolerir kadar garam yang tinggi karena terlalu banyak garam mengganggu kemampuan enzim untuk mengikat protein lain. Banyak enzim hanya dapat beroperasi dalam kisaran pH yang kecil; Oleh karena itu nilai pH dalam tubuh perlu diukur juga. pH yang tinggi dapat menghambat aktivitas enzim secara sempurna.

Ada dua jenis utama pengujian enzim: kontinu, di mana pembacaan konstan dilakukan, dan terputus-putus, di mana setelah jangka waktu tertentu reaksi kimia terganggu dan jumlah substrat dan konsentrasi produk sampingan diukur. Dalam pengujian terus menerus, untuk menguji tingkat substrat yang disebut NADH, yang mempengaruhi metabolisme, atau NADPH, yang mempengaruhi kemampuan tubuh untuk bereaksi dengan baik dengan terapi obat, uji spektrofotometri digunakan, karena mereka muncul di bawah sinar ultraviolet (UV). sinar. Apa yang disebut uji fluorometrik menentukan perbedaan fluoresensi di beberapa substrat enzim. Tes kalorimetri mengukur jumlah panas selama reaksi kimia enzim dan tes chemiluminescent mengukur cahaya yang dihasilkan selama reaksi kimia dan dapat mendeteksi antibodi untuk penyakit. Dalam pengujian terputus-putus, uji radiometrik dapat mengukur penyerapan atau pelepasan radioaktivitas ketika protein dan substrat mengikat dan pengujian kromatografi mengukur pembentukan produk sampingan dari ikatan enzim-substrat.

Beberapa tes darah sering dilakukan untuk menguji kadar enzim tertentu untuk menentukan kerusakan jantung. Ada sejumlah protein tertentu yang akan hadir dalam darah dalam volume yang lebih tinggi ketika otot jantung menjadi rusak, misalnya. Tes-tes ini harus dilakukan dengan hati-hati karena penyakit ginjal juga dapat menyebabkan tingkat enzim yang sama hampir sama. Kondisi lain yang dikenal sebagai hipertensi maligna dapat menyebabkan peningkatan kadar enzim jantung; oleh karena itu, tes selain uji enzim akan diperlukan untuk menentukan kemungkinan penyebab tingkat enzim yang tinggi.