Koloni Plymouth adalah usaha bisnis antara sekelompok keluarga Inggris dan pedagang dari tahun 1620 hingga 1691. Koloni ini berbasis di wilayah Cape Cod yang saat itu belum dijelajahi di tempat yang sekarang disebut Massachusetts. Meskipun masa hidup koloni yang relatif singkat dan kegagalan keuangan awal, Koloni Plymouth dianggap sebagai salah satu landmark dasar penting dalam sejarah AS. Pada tahun 1691 koloni tersebut dibubarkan, ketika dimasukkan ke dalam Koloni Teluk Massachusetts yang lebih besar.
Tidak seperti koloni Inggris dan Prancis lainnya yang perlahan bermunculan di Dunia Baru, perkecambahan Koloni Plymouth dimulai dengan kebebasan beragama dan bukan keuntungan finansial. Sekelompok penyembah, menemukan metode agama Alkitab mereka dinodai oleh Gereja Inggris yang mapan, memisahkan diri dari Gereja Anglikan dan bertemu bersama secara pribadi. Dikenal sebagai Separatis, orang-orang ini dianiaya karena keyakinan mereka dan dipenjarakan serta rumah mereka digerebek. Kelompok tersebut melarikan diri ke Belanda untuk beberapa waktu sebelum memperoleh izin untuk menetap di benua Amerika.
Untuk membiayai ekspedisi mereka, Separatis membuat kontrak dengan sekelompok pedagang Inggris, Petualang Pedagang. Mereka memasok kaum Separatis dengan dana untuk perjalanan laut dan persediaan dengan imbalan bahan mentah dan barang-barang yang dipanen dari benua Amerika. Setelah serangkaian penundaan, kelompok itu berlayar dengan kapal terkenal Mayflower dan Speedwell pada September 1620.
Awal koloni di Dunia Baru goyah sejak awal. Cuaca yang bergejolak membuat kapal keluar jalur, dan kelompok itu mendarat di utara tujuan yang diharapkan, yang telah diberikan secara hukum kepada mereka. Rombongan itu tiba di awal musim dingin, tidak siap menghadapi kondisi keras di bagian utara benua itu. Musim dingin pertama itu, separuh penduduk koloni tewas. Bantuan dari penduduk asli setempat menyelamatkan para pendatang dari bencana total, dan pesta syukur diadakan pada tahun berikutnya.
Para kolonis menamai pendirian mereka Perkebunan Plimouth, dan meskipun mengalami kesulitan, koloni itu perlahan-lahan tumbuh. Mereka mengalami beberapa kemunduran, seperti pendatang baru pemukim Puritan religius tetapi sedikit persediaan yang menyertainya, dan meningkatnya defisit bagi Petualang Merchant karena pengiriman pendapatan yang lambat atau hilang. Setelah revolusi politik di Inggris, piagam Plymouth Colony tidak diperbarui dan diserap ke dalam koloni kerajaan yang lebih besar.
Terlepas dari kegagalan finansial dan pembubaran awal koloni, Plymouth Colony bersinar sebagai contoh pemerintahan mandiri dan kebebasan beragama yang kemudian mendefinisikan Amerika Serikat yang merdeka. Ketika kapal-kapal kelompok itu menyimpang dari jalurnya pada tahun 1620, kaum Separatis membuat perjanjian mereka sendiri, Mayflower Compact. Perjanjian ini menetapkan catatan tertulis pertama di zaman modern pemerintahan dengan persetujuan rakyat. Didirikan atas dasar kebebasan beragama, Koloni Plymouth membuka jalan bagi kelompok agama lain yang mencari perlindungan di Dunia Baru. Wisatawan dapat mengunjungi lokasi asli koloni di Massachusetts, melihat batu, Plymouth Rock, di mana Separatis diduga turun dari Mayflower.