Enzim adalah protein yang memungkinkan reaksi kimia dalam tubuh terjadi berkali-kali lebih cepat daripada yang seharusnya. Dalam beberapa kasus, reaksi tidak akan berlangsung sama sekali kecuali ada enzim tertentu. Seiring dengan pH, suhu dan konsentrasi substrat, konsentrasi enzim memiliki pengaruh penting pada proses reaksi. Dengan asumsi jumlah zat, atau substrat, yang mengambil bagian dalam reaksi kimia tetap sama, konsentrasi rendah dapat menyebabkan reaksi kimia berlangsung lambat. Di sisi lain, konsentrasi tinggi dapat mempercepat reaksi, sampai tingkat maksimum yang mungkin tercapai.
Setiap enzim spesifik untuk reaksi kimia tertentu atau sekelompok reaksi. Sebuah situs lampiran pada enzim mengikat substrat spesifik saat reaksi berlangsung. Setelah reaksi, substrat dilepaskan dan enzim dapat digunakan kembali.
Ketika mempelajari konsentrasi enzim dan mengamati pengaruhnya pada suatu reaksi, percobaan biasanya dimulai dengan konsentrasi enzim yang relatif rendah. Ini berarti bahwa substrat biasanya hadir secara berlebihan pada awalnya. Laju reaksi dapat diukur dengan jumlah produk yang terbentuk dari waktu ke waktu. Ketika larutan enzim menjadi lebih pekat, tumbukan antara enzim dan molekul substrat lebih mungkin terjadi. Ini berarti bahwa, ketika konsentrasi ditingkatkan, laju reaksi meningkat secara linier, hingga mencapai tingkat tertentu di mana ia mulai mendatar.
Reaksi yang paling efisien mungkin terjadi ketika setiap situs pada setiap enzim terus-menerus ditempati oleh substrat. Setelah titik ini tercapai, konsentrasi enzim yang lebih tinggi diperlukan untuk meningkatkan laju reaksi. Ini membuat enzim baru tersedia untuk mengikat substrat. Ketika semua molekul substrat melekat pada enzim, peningkatan konsentrasi enzim tidak akan lagi mempercepat proses reaksi. Enzim tambahan yang ditambahkan tidak akan memiliki substrat cadangan untuk dikerjakan, dan laju reaksi tetap pada batas maksimum.
Jika semua faktor yang dapat mengubah laju reaksi, seperti pH, suhu dan konsentrasi substrat, ditetapkan, maka mengukur laju reaksi menjadi cara untuk mengukur konsentrasi enzim. Pengukuran laju reaksi dilakukan, dan persamaan matematis digunakan untuk menentukan jumlah enzim aktif secara akurat. Saat mengukur konsentrasi, penting untuk memastikan bahwa substrat yang ada cukup untuk menjenuhkan semua enzim dalam larutan.