Kalibrasi spektrofotometer adalah proses di mana instrumen ilmiah yang dikenal sebagai spektrofotometer dikalibrasi untuk memastikan bahwa instrumen tersebut berfungsi dengan baik. Ini penting, karena memastikan bahwa pengukuran yang diperoleh dengan instrumen akurat. Prosedurnya sedikit berbeda untuk instrumen yang berbeda, dengan sebagian besar pabrikan menyediakan panduan kalibrasi terperinci dalam manual pemilik sehingga orang tahu cara mengkalibrasi peralatan dengan benar. Ketika proses ini dilakukan, orang yang melakukannya harus membuat catatan di log yang dilampirkan ke peralatan dan catatan percobaan mereka, sehingga orang tahu kapan perangkat terakhir kali dikalibrasi dan ditangani, dan oleh siapa.
Spektrofotometer mampu memancarkan dan menerima cahaya. Perangkat ini digunakan untuk menganalisis sampel bahan uji dengan melewatkan cahaya melalui sampel dan membaca intensitas panjang gelombang. Sampel yang berbeda memengaruhi cahaya dengan cara yang berbeda, memungkinkan peneliti atau teknisi untuk mempelajari lebih lanjut tentang bahan dalam sampel uji dengan melihat bagaimana cahaya berperilaku saat melewati sampel. Kalibrasi spektrofotometer diperlukan untuk memastikan bahwa hasilnya akurat.
Dalam kalibrasi spektrofotometer, larutan referensi digunakan untuk menghilangkan peralatan. Solusi ini memberikan pembacaan dasar atau nol. Perangkat dikalibrasi dengan menempatkan larutan referensi di dalam spektrofotometer, meniadakan pengaturan, dan menjalankan instrumen. Kemudian, sampel bahan uji yang sebenarnya dapat dilakukan spektrofotometri dengan keyakinan bahwa mesin telah dikalibrasi dan berfungsi dengan baik.
Dalam spektrofotometer sinar tunggal, satu berkas cahaya dihasilkan, dan perangkat harus dikalibrasi ulang untuk setiap penggunaan. Dalam spektrofotometer berkas ganda, berkas dapat dikirim melalui sampel uji dan sampel referensi pada saat yang sama untuk menghasilkan dua set hasil yang dapat digunakan untuk referensi dan kalibrasi. Dalam kedua kasus tersebut, kalibrasi spektrofotometer dapat dilakukan di laboratorium oleh seseorang yang bekerja dengan mesin tersebut. Jika mesin mengalami masalah serius, mungkin akan dikirim ke pabrikan untuk pemeliharaan, perbaikan, dan kemungkinan penggantian.
Agar spektrofotometer berfungsi dengan baik, spektrofotometer harus dipanaskan terlebih dahulu sebelum digunakan. Banyak perangkat membutuhkan waktu sekitar 10 menit untuk pemanasan. Penting untuk menghindari melakukan kalibrasi spektrofotometer selama fase pemanasan karena ini akan membuang pengaturan. Penting juga untuk diperhatikan bahwa untuk jenis panjang gelombang tertentu, filter dan lampiran khusus mungkin diperlukan agar perangkat dapat berfungsi.