Mendefinisikan budaya penduduk asli Amerika adalah tugas yang sulit tidak harus karena kepercayaan dan kebiasaan yang menjadi ciri penduduk bersejarah ini sulit untuk dipahami tetapi lebih karena fakta bahwa penduduk asli Amerika adalah penduduk yang sangat beragam. Sama seperti mendefinisikan Amerika akan membutuhkan pemeriksaan budaya dari seluruh negeri, budaya asli Amerika harus memeriksa berbagai daerah dan suku. Secara umum, sebagian besar budaya penduduk asli Amerika sangat spiritual dan berorientasi pada kelompok.
Karena keragaman yang luas di antara penduduk asli Amerika, menggambarkan budaya mereka harus bergantung pada penjelasan kesamaan daripada berfokus pada tradisi tertentu yang mungkin tidak ada di setiap suku. Mungkin aman untuk mengatakan bahwa spiritualitas seragam di seluruh bangsa ini. Spiritualitas tidak selalu agama, dan sama seperti agama berbeda di antara orang-orang di seluruh dunia, keyakinan agama di dalam penduduk asli Amerika juga sangat bervariasi.
Sifat spiritual ini paling sering diungkapkan melalui upacara yang memberi penghormatan kepada dewa atau aspek alam. Beberapa suku percaya pada satu dewa tertentu, sementara yang lain, dengan cara yang lebih Yunani, menggambarkan roh yang berbeda sebagai makhluk dalam sistem kepercayaan mereka. Sebagian besar upacara keagamaan difokuskan pada penghargaan atas perbuatan yang diyakini telah dilakukan oleh dewa atau makhluk ini untuk suku atau masyarakat. Beberapa upacara serupa dengan agama-agama Barat, sementara yang lain mungkin tampak eksentrik bagi orang luar.
Ada juga motif alam dalam budaya penduduk asli Amerika. Banyak warga Amerika rata-rata tidak terlalu memikirkan dunia tempat mereka tinggal, sering mengabaikan begitu banyak sumber daya yang dieksploitasi agar orang dapat menikmati gaya hidup mereka. Ini sangat kontras dengan tema budaya penduduk asli Amerika karena kebanyakan penduduk asli Amerika sangat percaya pada budidaya dan pelestarian sumber daya alam.
Salah satu cara di mana budaya asli Amerika merangkul alam adalah melalui penggunaan semua sumber daya. Biasanya, hewan yang digunakan untuk makanan juga digunakan untuk banyak hal lainnya. Jarang ada bagian dari hewan yang terbuang, sebagian besar karena kepercayaan bahwa, untuk mengambil nyawa, setidaknya harus digunakan dan tidak dibunuh dengan sia-sia.