Bakteriell endotoxintestning involverar vanligtvis användningen av reagens som, när de blandas i en lösning med en möjlig förorening, orsakar en reaktion, vilket indikerar närvaron av ett endotoxin. Kromogena tester, gelpropptest och turbidimetrisk testning är de metoder som forskare vanligtvis använder för bakteriell endotoxintestning. Tekniker använder dessa utvärderingsmetoder på en mängd olika ämnen och föremål vid kontroll av endotoxinkontamination. Vatten, de råvaror som används för att tillverka mediciner, utrustning och förpackningar måste alla klara endotoxinstandarder.
Bakterier, svampar och virus har alla skyddande yttre membran som består av lipopolysackarider, även kallade LPS. Lipiddelen av dessa kedjor innehåller endotoxiner. Dessa ämnen stannar i allmänhet inom membranet men frigörs under celldelningsprocessen och under cellulär förstörelse eller lys. Hos människor orsakar dessa ämnen feber, onormal koagulering, septisk chock och andra symtom även om endotoxiner till skillnad från exotoxiner i cellen inte omvandlas till en toxoid. I allmänhet kontrollerar mikrobiologer förekomsten av endotoxiner associerade med olika gramnegativa bakterier, inklusive E. coli.
Gelpropptestet, eller Limulus ameboocyte lysate (LAL) analys, involverar användning av en membranförstörande kemikalie som härrör från amöbocyterna i hästskokrabban, även kallad Limulus polyphemus. Tekniker observerar en positiv indikation på endotoxiner om koagulering eller gelning uppstår när lysatet exponeras för föremålet eller ämnet i fråga. Mikrobiologer använder vanligtvis denna metod för bakteriell endotoxintestning i samband med kromogena och turbidimetriska tester för avgörande resultat.
Kromogent bakteriell endotoxintestning använder en specialbehandlad LAL. När detta lysat kommer i kontakt med ett endotoxin, producerar reaktionen en specifik färg. Den sista testprocessen inkluderar mätning av lösningens grumlighet eller grumlighet. Tekniker exponerar lösningen som bildades i gelkoageltestet för en spektrofotometer, som avger en ljusstråle. Genom att mäta förlusten av ljusintensiteten i strålen när den passerar genom lösningen kan mikrobiologer avgöra om ett endotoxin är närvarande eller inte.
Laboratorier genomför vanligtvis dessa tre bakteriella endotoxintest två eller tre gånger för att säkerställa korrekta resultat. Geltestet används inte uteslutande eftersom dess lägsta detektionsgräns är 0.03 Ehrlich-enheter per milliliter (EU/ml). Kromogena och turbidimetriska tester detekterar endotoxiner i intervallet 0.005 EU/ml. Säkerhetsparametrarna skiljer sig mycket beroende på vilket ämne som testas. Medan sterilt vatten som används för injektions- eller bevattningsändamål inte får innehålla mer än 0.25 EU/ml, kan sterilt vatten för inhalationsändamål innehålla upp till 0.5 EU/ml.