Permohonan untuk asuransi jiwa atau kesehatan sering kali menyertakan tes deteksi nikotin. Kromatografi gas cair dapat mendeteksi nikotin — atau metabolit utamanya, cotinine — dalam sampel urin, darah, air liur, dan rambut. Pengukuran kotinin dalam urin dianggap sebagai teknik deteksi nikotin yang paling sensitif. Tak satu pun dari tes ini akan membedakan secara sempurna antara perokok aktif, perokok pasif atau perokok pasif, dan bukan perokok, karena perbedaan individu dalam metabolisme nikotin sangat bervariasi. Namun, tes deteksi nikotin akan memberikan perkiraan yang baik tentang paparan nikotin secara keseluruhan.
Nikotin adalah bahan kimia adiktif yang ditemukan dalam rokok dan tembakau kunyah. Mengunyah atau menghirup tembakau memasukkan nikotin ke dalam tubuh, di mana ia dimetabolisme oleh hati dan diekskresikan dalam urin. Metabolit utama nikotin adalah kotinin, dan kotinin adalah metode utama deteksi nikotin, karena memiliki waktu paruh hingga 10 kali lebih lama dari nikotin. Dengan kata lain, itu stabil di dalam tubuh lebih lama. Dalam kasus dugaan overdosis nikotin, seperti ketika seorang anak makan permen karet nikotin, nikotin diukur, bukan kotinin.
Deteksi nikotin dengan menggunakan sampel rambut jarang dilakukan di luar uji eksperimental, karena mahal. Namun, pengujian rambut dapat mengevaluasi penggunaan tembakau dalam jangka panjang, karena dapat mendeteksi paparan nikotin hingga 10 hari sebelum sampel diambil. Tes nikotin saliva sederhana dan non-invasif; air liur diserap dari mulut menggunakan kain sampel atau swab, tetapi mungkin sulit untuk mendapatkan sampel yang cukup besar. Anak-anak atau orang dewasa dengan mulut kering mungkin tidak menghasilkan cukup air liur untuk sampel pengujian. Tes air liur juga bergantung pada paparan nikotin yang sangat baru dan mungkin gagal membedakan perokok aktif ringan dari perokok pasif.
Sampel darah memungkinkan untuk mendeteksi kotinin dalam plasma darah, meskipun sampel darah membutuhkan lebih banyak pemrosesan daripada sampel urin atau air liur. Sampel darah pertama-tama disentrifugasi untuk memisahkan sel darah dari plasma, dan protein berat kemudian diendapkan. Tabung reaksi disentrifugasi untuk kedua kalinya dan kemudian ditempatkan di evaporator untuk menghilangkan cairan yang tersisa; protein kering, termasuk kotinin, dilarutkan menggunakan metil alkohol. Sekali lagi, tabung reaksi disentrifugasi untuk memisahkan protein berat yang tersisa, dan cairan dituangkan dan digunakan untuk analisis. Proses ini lebih memakan waktu dan mahal daripada tes urin atau air liur.
Deteksi nikotin menggunakan urin sangat sensitif dan akan mendeteksi perokok pasif dalam kadar yang kecil sekalipun. Ini adalah metode yang paling umum digunakan oleh perusahaan asuransi untuk membedakan perokok aktif dari perokok pasif. Baik deteksi nikotin melalui urin, air liur, atau serum darah, perbedaannya dapat dilihat antara orang yang aktif merokok tiga batang atau lebih sehari dan mereka yang perokok pasif tingkat tinggi. Perokok berat juga dapat dibedakan dari perokok ringan dengan jumlah cotinine dalam sampel.