Vad är rekombinant kloning?

Rekombinant kloning hänvisar vanligtvis till rekombinanta DNA-tekniker. Detta innebär att man kombinerar DNA-sekvenser som inte skulle existera naturligt. Dessa tekniker kallas också ibland för genteknik. Specifika segment av DNA isoleras och kombineras i en mindre enhet av DNA som kommer att replikera och amplifiera antalet klonade DNA-molekyler.

Värdorganismerna för rekombinant kloning är ofta bakterier. Bäraren av DNA som används för kloning är känd som en vektor och är vanligtvis ett virus eller en plasmid – en cirkulär bit av bakteriellt DNA som är utanför den bakteriella kromosomen. En plasmid för kloning kommer att ha ett replikationsursprung så att den kan replikera sig själv, ett kloningsställe och någon sorts valbar markör, såsom antibiotikaresistens. Detta kommer att säkerställa urvalet och förökningen av cellerna som innehåller klonen.

Kloningsstället har en specialiserad sekvens som kommer att kännas igen av ett visst restriktionsendonukleas – ett enzym som känner igen specifika DNA-sekvenser och skär nukleotiderna. Plasmiden kommer först att skäras så att den är linjär. Forskare försöker i allmänhet använda restriktionsendonukleaser som lämnar ”klibbiga ändar” som överlappar varandra och kommer att hybridisera målgenens ändar med kompatibla sekvenser i vektorn med hjälp av ligas, vilket återställer den till en cirkel. När genen väl har klonats in i vektorn, introduceras vektorn i sin expressionsvärd, vanligtvis genom en process som kallas transformation, och odlas upp i stora mängder. DNA:t kan sedan isoleras och användas i experiment.

Rekombinant kloning har möjliggjort analys av stora mängder molekyler som normalt endast uttrycks övergående i cellen, såsom mRNA och proteiner. Detta har revolutionerat studiet av biologi. Det finns många praktiska tillämpningar av rekombinant kloning.

Proteiner som humant tillväxthormon kan uttryckas i stora mängder genom rekombinant kloning. Transgena växter används i jordbruket för att förhindra angrepp av insekter och patogener. Många livsmedel har modifierats genetiskt för att förbättra dem, och kor har behandlats med bovint tillväxthormon som produceras genom rekombinant kloning för att öka mjölkproduktionen. Genterapi har använts i många terapier, inklusive för att bota en form av blindhet. Djur klonas till och med, även om klonerna ofta drabbas av hälsoproblem.

Vissa användningar av rekombinant kloning är mycket kontroversiella. Många människor är emot att äta genetiskt modifierade livsmedel eller att dricka mjölk med rekombinant hormon i. Det finns mycket oro för att grödor som har förändrats genetiskt kan sprida sina nya gener till den lokala floran.
Vissa människor är filosofiskt emot att förändra existerande livsformer. Det finns nästan universellt fördömande av idén om mänsklig kloning. Det återstår att se om dessa nya tekniker kommer att nå sin fulla praktiska potential, eller om samhället kommer att begränsa användningen av dem.