ELISA-proceduren är en procedur som används för att utföra en enzymkopplad immunosorbent array (ELISA), ett test som kan användas för att identifiera förekomsten av specifika proteiner och för att bestämma deras koncentrationer. Det finns faktiskt ett antal olika procedurer som kan användas för ett ELISA-test, inklusive direkta, indirekta och så kallade ”sandwich”-procedurer. I samtliga fall utförs ELISA-proceduren i ett labb under kontrollerade förhållanden för att minimera risken för falska resultat.
För att kunna genomföra ett ELISA-test är det nödvändigt att ha ett prov som blod. Ett vanligt skäl att genomföra en ELISA är att testa för exponering för ett smittämne, i vilket fall provet i fråga kan ha eller inte har ett specifikt protein, och testet utförs för att leta efter det proteinet. Testet kan också användas för att kontrollera koncentrationen av ett protein.
För att genomföra testet används ofta en anordning som kallas mikrotiterplatta. Fans av medicinska och kriminaldramer är förmodligen bekanta med mikrotiterplattor; de ser ut som små brickor med ett antal insatser, som var och en rymmer en flaska. I sandwich ELISA-proceduren börjar teknikern med att belägga flaskorna med ett känt antigen i en känd koncentration och sedan tvätta dem med en buffertlösning. Därefter tillsätts ett serum gjort från ett patientprov tvättat i samma buffertlösning.
Om patienten redan har antikroppar mot antigenerna i rören kommer de att fastna på rörens sidor. Nästa steg i ELISA-proceduren innefattar införandet av samma antigen, märkt med ett enzym, till rören. Antigenet låser sig till antikropparna som har fastnat på sidorna av rören. Enzymet fluorescerar eller ändrar färg, vilket gör att teknikern kan se att serumet hade antikroppar som låste sig till antigenerna, och att bestämma koncentrationen, på basis av intensiteten av enzymreaktionen.
En ELISA-procedur är mycket känslig och extremt exakt, där tekniker använder mycket specifika antigener för att säkerställa att de identifierar rätt antikroppar, eller vice versa, beroende på vilken typ av test som utförs. Men falska positiva resultat förekommer. I ett exempel på en falsk positiv används ELISA-testning vanligtvis för att kontrollera tecken på HIV-exponering, och det ger ibland ett falskt positivt resultat eftersom lösningen kan binda till ett protein associerat med HIV som vissa människor har utan att bli infekterade. Det är därför ett positivt måste bekräftas med en Western Blot.